با همکاری انجمن‏‌ بیماری شناسی گیاهی ایران

نویسندگان

1 عضو هیئت علمی دانشگاه تربیت مدرس

2 تهران، بزرگراه شهید چمران، خیابان یمن (تابناک)، جنوب به شمال نرسیده به انتهای خیابان، سمت راست، موسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور، بخش

چکیده

تاکستان‌های شمال شرق کشور (استان‌های خراسان شمالی، خراسان رضوی، سمنان، گلستان) برای ردیابی ویروس برگ بادبزنی مو (Grapevine fanleaf virus,GFLV)، ویروس همراه با پیچیدگی برگ مو شماره سه (Grapevine leafroll associated virus 3, GLRaV-3) و ویروس ای مو (Grapevine virus A, GVA) بررسی شدند. اکثر نمونه‌هایی که به صورت تصادفی جمع‌آوری شدند، فاقد علائم بیماری بودند. ولی در تعداد بسیار کمی از آن‌ها علائم زیگزاکی شدن ساقه، موزائیک، کوتاهی فاصله میان‌گره، دوقلو شدن جوانه و کوتولگی مشاهده شد. آلودگی نمونه‌ها با روش سرولوژیکی DAS-ELISA تعیین شد. نتایج حاصل از بررسی 588 نمونه با استفاده از آزمون الایز نشان داد که دست کم 78 درختچه مو به یک ویروس آلوده بودند و ویروس‌های GFLV و GLRaV-3 به ترتیب با حداقل 7 و 6/6 درصد آلودگی با‌لاترین میزان و ویروس GVA با دست کم 3 درصد آلودگی پس از آن‌ها قرار گرفت. با استفاده از آزمون RT-PCR و بکارگیری آغازگرهای اختصاصی، بخشی از ژن پروتئین پوششی ویروس برگ بادبزنی مو به طول حدود 321 جفت باز تکثیر شد. همچنین در تعدادی از نمونه‌های آلوده به GFLV علاوه بر قطعه مذکور، قطعه‌ای در حدود 150 جفت باز نیز همانند‌سازی شد. نتایج حاصل از این تحقیق بیانگر آن است که با توجه به وجود آلودگی سه ویروس مذکور در اغلب مناطق مورد تحقیق، استفاده از روش دقیق و حساس RT-PCR‌ برای تشخیص پایه‌های مادری عاری از آلودگی ضروری به نظر می‌رسد.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

Study on the status of three grapevine viruses in North-Eastern vineyards of Iran

نویسندگان [English]

  • Msoud Shams-Bakhsh 1
  • Maryam Ebrahim Ghomi
  • Reza Pourrahim 2

2 Researcher

چکیده [English]

Grapevines in north-eastern provinces of Iran (North Khorasan, Razavi Khorasan, Semnan and Golestan) were randomly surveyed for presence of Grapevine fanleaf virus (GFLV), Grapevine leafroll associated virus 3 (GLRaV-3) and Grapevine virus A (GVA). Symptoms of mosaic, abnormal double nodes, Z shaped, abnormal shoot development and reduced growth were observed in few of the plants. 588 samples of grapevine were tested for presence of three viruses in dormant canes, young leaves, shoot tips and petioles by double antibody sandwich-enzyme linked immunosorbent assay (DAS- ELISA). All three viruses were found to be present in vineyards of north-eastern provinces of Iran. From the 588 samples tested, 78 vines were found to be infected with at least one virus. ELISA tests showed presence of GFLV, GLRaV-3 and GVA in 7%, 6.6% and 3% of samples respectively. In addition, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to verify ELISA tests for GFLV in vine tissues. RT-PCR using specific primers directed to the GFLV coat protein gene region at the 3′ end of RNA2 amplified DNA of the expected size (321bp). Also the results showed presence of an unexpected 150 bp band in some samples.
These results indicated that RT-PCR as a rapid and sensitive detection method is necessary to confirm healthy plant material.
 

کلیدواژه‌ها [English]

  • Grapevine fanleaf virus (GFLV)
  • Grapevine leafroll associated virus 3 (GLRaV-3)
  • Grapevine virus A (GVA)
  • ELISA
  • RT-PCR
  • north-eastern of Iran
 
ANONYMOUS, 2004. Agricultural statistics of the years 2002-2003. The Organization of Statistics and Information Publication, Iran. Ministry of Jihad-e Agriculture.
BOVEY, R., W. GARTEL, W. B. HEWITT, G. P. MARTELLI and A. VUITENEZ, 1980. Virus and virus like disease of grapevines. Payot, Lausanne; La Maison Rustique, Paris; and Verlag Eugen Ulmer, Stuttgart. 181 pp.
CLARK, M. F. and A. N. ADAMS, 1977. Characteristics of the microplate method of enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of plant viruses. Journal of General Virology34: 475-483.
DELLAPORTA, S. L., J. WOOD and J. B. HICKS, 1983. A plant DNA miniprepapration. Plant Molecular Biology Reporter 1: 19-21.
HABILI, N., A. AFSHARIFAR and R. H. SYMONS, 2003. First detection of an Ampelovirus and Vitivirus in Iranian table grapes. 14th Meeting of ICVG, pp. 161-162. Locorotondo, Italy.
HEWITT, W. B. 1950. Fan leaf of grapevine in California. Phytopathology 40: 966.
HEWITT, W. B., G. MARTELLI, H. F. DAS and R. H. TAYLOR, 1970. Grapevine fanleaf Virus. C. M. I./A. A. B. Descriptions of Plant Viruses. No. 28.
IZADPANAH, K. 1983. An annotated list of virus and virus-like diseases of plants in Fars. (in Persian). College of Agriculture, ShirazUniversity. 188 p.
IZADPANAH, K., M. ZAKI-AGHL, R. P. ZHANG, S. D. DAUBERT and A. ROWHANI, 2003. Bermuda grass as a potential reservoir host for Grapevine fanleaf virus. Plant Disease 87: 1179-1182.
MARTELLI, G. P., 1993.Graft-transmissible diseases of grapevines. Handbook for detection and diagnosis, pp. 263. FAO Publication Division, Rome, Italy.
MARTELLI, G. P. 1999. Infectious diseases and certification of grapevines. Pp. 47-83. In: Options Mediterraneennea, Series B. Studies and Research. No. 29.
MOJTAHEDI, H., D. STURHAN, A. AKHIANI and SH. BAROOTI, 1980. Xiphinema species in Iranian vineyards. Nemat. Medit. 8: 165-170.
PARVIZI, R. 1989. Incidence of grapevine fanleaf virus in Uromia. Procced. 9th Plant Protec. Cong. Iran. Mashhad. P: 164.
PEARSON, R. C. and A. C. GOHEEN, 1988. Compendium of Grape Diseases. The American Phytopathological Society, St. Paul, Minnesota.
RAKHSHANDEHROU, F., R. POURRAHIM and H. ZAMANIZADE, 2004. Status of vitis viruses in some vineyards of Iran. Procced. 16th Plant Protec. Cong. Iran. Tabriz. P: 363.
ROWHANI, A., C. CHAY, D. A. GOLINO and B. W. FALK, 1993. Development of polymerase chain reaction technique for the detection of Grapevine fanleaf virus in grapevine tissue. Phytopathology 83: 749-753.
ROWHANI, A., M. A. MANINGAS, L. S. LILE, S. D. DAUBERT and D. A. GOLINO, 1995. Development of a detection system for viruses of woody plants based on PCR analysis of immobilized virions. Phytopathology 85: 347-352.
VUITTENEZ, A. 1970. Fan leaf of grapevine. Pp. 217-228, In: Virus Diseases of Small Fruits and Grapevines. (N. W. Frazier, J. P. Fulton, J. M. Thresh, R. H. Converse, E. H. Varaney and W. B. Hewitt, eds.). Univ.Calif. Agric. Sci., Berkeley. 290p.
WALTER, B. and MARTELLI, G. P. 1996.Sanitary selection of the grapevine, protocols for detection of viruses and virus-like diseases. Horticulture Science 12:465: 469.
ZAKI-AGHL, M. and K. IZADPANAH, 2003. Serological and molecular identification and prevalence of Grapevine fanleaf virus in Iran. Iranian Journal of Plant Pathology 39:
161-171.