نویسندگان
- شیرین فرزادفر
- غلامحسین مصاحبی
- علی آهون منش 1
- مینا کوهی حبیبی
- رضا پوررحیم 2
- کازوساتو اوشیما
- علیرضا گلنراقی
1 دانشگاه صنعتی اصفهان
2 تهران، بزرگراه شهید چمران، خیابان یمن (تابناک)، جنوب به شمال نرسیده به انتهای خیابان، سمت راست، موسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور، بخش
چکیده
به منظور تعیین پراکنش و مطالعه برخی خصوصیات بیولوژیکی و مولکولی جدایههای ایرانی ویروس موزائیک کلمگل (Cauliflower mosaic virus-CaMV)، از 32 مزرعه کلمگل
(Brassica oleracea var. botrytis) واقع در 6 استان کشور بازدید به عمل آمد. نمونهبرداری در فصول مختلف انجام و مجموعاً 323 نمونه برگی کلمگل علائمدار جمعآوری گردید. این نمونهها با روش سرولوژیکی الایزا و به کمک آنتیبادی اختصاصی CaMV مورد سنجش قرار گرفتند. نتایج آزمون سرولوژیکی با استفاده از آزمونهای بیولوژیکی و نیز واکنش زنجیرهای پلیمراز مورد تأیید قرار گرفت. بر اساس آزمون الایزا، 292 نمونه کلمگل (4/90 درصد) به CaMV آلوده بودند. میزان آلودگی در مزارع نمونهبرداری شده بین 6/63 تا 100 درصد متفاوت بود. خصوصیات بیولوژیکی 21 جدایه از مناطق مختلف و با شدت علائم متفاوت، بر اساس بیماریزایی آنها روی شلغم (Brassica rapa)، داتوره (Datura stramonium) و کلمقمری (Brassica oleracea var. gongylodes) مورد مطالعه قرار گرفت. این جدایهها روی شلغم علائم متفاوتی شامل لکههای موضعی و پس از آن رگروشنی، موزائیک، رگنواری، چینخوردگی و بازماندن از رشد ایجاد نمودند. شدت علائم سیستمیک ایجاد شده بسته به جدایه مورد بررسی متفاوت بود. برخلاف شلغم، علائم ایجاد شده در کلمقمری محدود به برگهای پایینی و مایهزنی شده بود و شدت علائم نیز در مقایسه با شلغم بسیار خفیفتر بود. تمامی گیاهان کلمقمری مایهزنی شده با جدایههای مورد نظر حالت بهبودی نشان داده و علائم در برگهای بالایی مشاهده نشد. یازده جدایه در گیاه داتوره نیز لکههای موضعی ایجاد نموده و دو جدایه علاوه بر ایجاد لکه موضعی، این میزبان را بصورت سیستمیک آلوده نمودند. همه 21 جدایه CaMV با شته سبز هلو (Myzus persicae) منتقل گردیدند. برای تجزیه مولکولی و رسم درخت تبارزایی، ژن شماره شش (ORFVI) مربوط به نه جدایه با استفاده از آغازگرهای اختصاصی، تکثیر و تعیین ترادف گردید. نتایج بدست آمده، نشاندهنده یکنواختی بالای این ناحیه (9/96 تا 100 درصد) در بین جدایههای ایرانی بود. مقایسه این ترادفها با ترادفهای موجود در بانک ژن نشان داد که این جدایهها دارای بیشترین یکنواختی (1/96 تا 7/96 درصد) با جدایه D/H (از مجارستان) میباشند. بر اساس تجزیه تبارزایی، جدایههای ایرانی مورد مطالعه در گروه جدایههای غیر آمریکای شمالی و در یک شاخه جداگانه قرار گرفتند. همچنین با استفاده از آنزیم برشی Hpy99I، جدایههای ایرانی مورد مطالعه از سایر جدایههای خارجی، کاملاً تفکیک شدند.
کلیدواژهها
عنوان مقاله [English]
Distribution and some biological and molecular properties of Cauliflower mosaic virus isolates from Iranian cauliflower fields
نویسندگان [English]
- Shirin Farzadfar
- Gholamhosin MOSAHEBI
- Ali Ahoonmanesh 1
- Mina KOOHI-HABIBI
- Reza Pourrahim 2
- K. OHSHIMA
- Alireza Golnaraghi
2 Researcher
چکیده [English]
A survey was conducted to determine the distribution of Cauliflower mosaic virus (CaMV) in cauliflower (Brassica oleracea var. botrytis) fields. A total of 323 symptomatic cauliflower leaf samples were collected during different growing seasons from 32 fields in six provinces of Iran. These samples were tested by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using specific CaMV-polyclonal antibody. Serological diagnosis was confirmed by biological and polymerase chain reaction (PCR) tests. Based on ELISA, 292 cauliflower samples (90.4%) were infected with CaMV, ranging between 63.6-100% in the surveyed fields. Biological diversity of 21 CaMV isolates from various regions and with different symptom severity was evaluated based on their reactions on turnip (Brassica rapa), jimpson weed (Datura stramonium) and kohlrabi (B. oleracea var. gongylodes) plants. These isolates caused a variety of symptoms on turnip, including local lesions followed by vein clearing, mosaic, vein banding, rugosity and stunting. The severity of systemic symptoms observed varied depending on the isolate. In contrast, symptoms produced by the same isolates in Kohlrabi plants were restricted to older leaves and were much milder. Kohlrabi plants infected by all isolates tested eventually showed recovery and became asymptomatic. Eleven isolates induced local lesions on jimpson weed, and for two isolates, these symptoms were followed by systemic infections. All 21 isolates studied, were transmitted by green peach aphid (Myzus persicae). For molecular studies, ORF VI gene of nine selected CaMV isolates were amplified using specific primers. Comparison of sequences of the amplified fragments revealed a high identity (96.9-100%) among Iranian isolates studied. Comparison of these sequences with those available at GenBank indicated the highest identities of these isolates with D/H isolate from Hungary (96.1-96.7%). Phylogenetic studies showed clustering of Iranian isolates in a separate branch, together with the non-North American isolates. The Iranian isolates were also well differentiated from other exotic isolates using Hpy99I restriction enzyme.
کلیدواژهها [English]
- Cauliflower mosaic virus
- Caulimovirus
- ORF VI
- nucleotide sequencing
- DNA viruses
- Crucifer viruses